Agar je polymer používaný k pěstování bakterií. Agar je nejprve dodáván jako prášek a při rozpuštění ve vroucí vodě a ochlazován, tuhne na pevný povrch pro růst bakterií. Existuje mnoho různých druhů agaru, které lze použít k pěstování bakterií, které jsou předmětem zájmu, v závislosti na druhu a vašich potřebách v oblasti výzkumu. Živočišný agar je oblíbený, protože může růst řadu druhů bakterií a hub a obsahuje mnoho živin potřebných pro robustní růst bakterií.
Video dne
Komponenty nutričního agaru
Nutriční agar obsahuje 0,5% peptonu, což je enzymatické štěpení živočišných bílkovin. Pepton je hlavní zdroj organického dusíku pro rostoucí bakterie. Živočišný agar také obsahuje 0,3 procenta hovězího extraktu, který obsahuje látky rozpustné ve vodě, které pomáhají při růstu bakterií, jako jsou vitamíny, uhlohydráty, organické sloučeniny dusíku a soli. Poslední složkou živného agaru je agar 1,5%, což je ztuhovací činidlo.
Jak vyrobit živinový agar
Dřívější složky rozpusťte v požadovaném objemu vody. Pro výrobu 1 litru živného agaru přidejte 5 gramů peptonu, 3 gramy hovězího extraktu a 15 gramů agaru a zajistěte, aby konečný objem této směsi byl 1 litr přidáním destilované vody. Tato směs se zahřeje za míchání, aby se zcela rozpustily všechny složky. Autoklávujte rozpuštěnou směs při teplotě 121 ° C po dobu 15 minut v tekutém cyklu.
Jak nalévat živné agarové desky
Jakmile byl živný agar autoklávován, nechte ho ochladit, ale neztuhneme. Přidejte v tomto okamžiku antibiotika. Vezměte víčka a rozšiřte odpovídající množství Petriho misky na sterilní povrch. Obecně platí, že 1 litr agaru nalije asi 50 velkých Petriho misí - 100 milimetrů průměru - nebo 100 malých Petriho misí - 60 milimetrů. Zapálte plamen poblíž, abyste udrželi oblast kolem desek sterilní. Při otevírání láhve agaru projděte otvor plamenem, abyste ho sterilizovali. Do každé desky nasypte živný agar a nechte desky na sterilním povrchu, dokud agar neztuhnul. Nahraďte víčko každé Petriho misky a desky ukládejte do chladničky.
Doporučení pro nalévání a ukládání desek
Naplňte každý deska na polovinu na dvě třetiny. Snažte se odstranit všechny vzduchové bubliny, protože to znesnadní šíření bakterií nad deskou, jakmile ztuhne. Bubliny mohou být vypáleny pomocí plamene. Agarové desky skladujte v chladničce. Tím se zabrání kondenzaci víčka Petriho misky na kapalný agar. Pokud ukládáte desky dlouhodobě, zkontrolujte jejich růst nebo sušení před jejich použitím.Desky obsahující antibiotika by měly být použity do 2 týdnů od přípravy.
